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基于微滴式数字PCR技术对乙型肝炎低病毒血症患者血浆HBV DNA精准检测
文献摘要：
目的 建立基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术检测HBV DNA的方法,并实现对乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA的精准检测.方法 构建pUC57-HBV质粒作为阳性对照质粒,设计合成HBV DNA ddPCR引物及探针,以梯度稀释的阳性对照质粒为模板进行ddPCR检测,完成标准曲线构建和检出限分析,并进行检测的重复性和特异性分析.收集首都医科大学附属北京佑安医院19例乙型肝炎低病毒血症患者的血浆样本(HBV DNA<10 IU/mL),提取HBV DNA后进行ddPCR检测.结果 建立的基于ddPCR技术检测HBV DNA的方法检测下限低至1 copy/μL(阳性质粒稀释法);对3种不同拷贝的阳性对照质粒(1×102、1×101、1×100 copies/μL)重复检测的变异系数分别为18.8％、9.9％、9.7％,且具有100％特异性;应用该方法在低于临床检测下限的乙型肝炎低病毒血症患者中,以1 copy/μL为临界值,HBV DNA的阳性检出率为68.42％.结论 建立的ddPCR检测低病毒载量HBV DNA检测方法能够高灵敏和高特异地对乙型肝炎低病毒血症患者HBV DNA实现绝对定量.
文献关键词：
微滴式数字PCR;乙型肝炎病毒;低病毒血症;HBV DNA;精准检测
中图分类号：
作者姓名：
范子豪;田原;徐玲;曹亚玲;陈思思;潘桢桢;张向颖;段钟平;任锋
作者机构：
首都医科大学附属北京佑安医院,北京肝病研究所,北京100069
文献出处：
引用格式：
[1]范子豪;田原;徐玲;曹亚玲;陈思思;潘桢桢;张向颖;段钟平;任锋-.基于微滴式数字PCR技术对乙型肝炎低病毒血症患者血浆HBV DNA精准检测)[J].临床检验杂志,2022(02):87-91
A类：
B类：
低病毒血症,HBV,精准检测,droplet,digital,ddPCR,pUC57,质粒,阳性对照,设计合成,引物,梯度稀释,标准曲线,线构,检出限,首都医科大学,IU,检测下限,copy,稀释法,拷贝,copies,重复检测,临床检测,阳性检出率,病毒载量,高灵敏,异地,绝对定量,乙型肝炎病毒
AB值：
0.219975
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