典型文献
B群链球菌及其大环内酯类耐药基因LAMP快速可视化检测方法的建立和初步应用
文献摘要:
目的 建立一种快速可视化检测B群链球菌(GBS)及其大环内酯类耐药基因的环介导恒温扩增(LAMP)方法,为临床GBS检测提供新方法.方法 针对GBS特异性基因cfb和大环内酯类耐药基因ermB、mefA/E和linB设计LAMP反应的引物;建立并优化LAMP的反应体系和反应条件,反应结果通过DNA扩增曲线和肉眼观察反应液颜色变化判断;以携带上述基因的质粒DNA为检测标准,确定LAMP方法检测目标基因的敏感性与特异性,并与PCR方法的检测结果比较;采用LAMP方法检测临床300份孕产妇阴道直肠拭子标本中GBS,与分离培养法的检出率进行统计学分析;采用LAMP方法检测80株GBS临床分离株中大环内酯类耐药基因,并与药敏试验结果进行统计学分析.结果 建立了快速可视化检测GBS及其大环内酯类耐药基因的LAMP反应体系和方法,该法在63℃、45 min内完成;该法能够特异性检测pMD-cfb、pMD-ermB、pMD-mefA/E、pMD-linB质粒DNA,其灵敏度为10-5ng/μL,是PCR方法灵敏度的100倍;对300份孕产妇阴道直肠拭子标本进行检测,LAMP方法对GBS检出率为12.7%,分离培养检出率为11.3%,两者没有统计学差异(P>0.05);药敏试验和LAMP方法检测80株GBS中大环内酯类耐药菌株的检出率分别为53.8%和48.8%,二者没有统计学差异(P>0.05).结论 本研究建立的GBS及其大环内酯类耐药基因LAMP检测方法具有特异性好、灵敏度高、快速、结果可视等优点,对临床新生儿GBS疾病的预防和治疗具有重要意义.
文献关键词:
B群链球菌;大环内酯类耐药基因;环介导恒温扩增技术;快速检测方法;可视化检测方法
中图分类号:
作者姓名:
王佳敏;车正平;吴明雨;杨维青
作者机构:
肇庆医学高等专科学校,肇庆526020;广东医科大学临床微生物学教研室,东莞523808;东莞市第一人民医院,东莞523059
文献出处:
引用格式:
[1]王佳敏;车正平;吴明雨;杨维青-.B群链球菌及其大环内酯类耐药基因LAMP快速可视化检测方法的建立和初步应用)[J].中国抗生素杂志,2022(12):1320-1325
A类:
linB,反应液颜色变化
B类:
链球菌,大环内酯类耐药基因,LAMP,快速可视化检测,可视化检测方法,初步应用,GBS,特异性基因,cfb,ermB,mefA,引物,反应体系,反应条件,肉眼,带上,质粒,检测标准,敏感性与特异性,结果比较,孕产妇,阴道,分离培养,培养法,统计学分析,临床分离株,药敏试验,特异性检测,pMD,5ng,统计学差异,耐药菌株,灵敏度高,新生儿,预防和治疗,环介导恒温扩增技术,快速检测方法
AB值:
0.17996
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