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中华鳖胚胎肝成纤维细胞的原代培养及其聚肌苷酸胞苷酸(Poly I:C)刺激模型构建
文献摘要：
为建立中华鳖胚胎肝成纤维细胞的体外分离培养体系,研究聚肌苷酸胞苷酸(Poly I:C)刺激对细胞干扰素生成通路相关因子的影响,从而最终构建基于该成纤维细胞的干扰素生成通路激活模型,以发育至23期的中华鳖胚胎为实验材料,采用胰蛋白酶消化法得到肝成纤维细胞,结合细胞形态学、生长曲线和PCR法进行鉴定,并分析其生物学特性.之后,用Poly I:C转染细胞24 h,检测细胞形态和干扰素生成信号通路相关因子的基因和蛋白表达水平.结果表明:应用构建的体外分离培养体系得到的中华鳖胚胎肝成纤维细胞生长状况良好,成功传至20代,该细胞的生长曲线为"S"形,符合细胞增殖规律,可检测到成纤维细胞标记基因VIM和ACTA2,确定为成纤维细胞.冻存前后,细胞存活率分别为90.51％和82.95％.Poly I:C转染后,RIG-Ⅰ和MAVS蛋白的表达量上调,RIG-Ⅰ基因的表达量上调,m6 A和YTHDF2基因的表达量下调,并引起细胞形态的变化.综上,本研究成功建立了中华鳖胚胎肝成纤维细胞的体外分离培养体系,并构建了基于该细胞的干扰素生成通路激活模型.
文献关键词：
中华鳖;原代培养;成纤维细胞;干扰素
中图分类号：
作者姓名：
王水涛;何盛盛;江玲丽;高有领
作者机构：
浙江万里学院 生物与环境学院,浙江 宁波315100;宁波卫生职业技术学院,浙江 宁波315100
文献出处：
引用格式：
[1]王水涛;何盛盛;江玲丽;高有领-.中华鳖胚胎肝成纤维细胞的原代培养及其聚肌苷酸胞苷酸(Poly I:C)刺激模型构建)[J].浙江农业学报,2022(01):60-69
A类：
B类：
中华鳖,成纤维细胞,原代培养,肌苷酸,胞苷酸,Poly,外分,分离培养,干扰素,相关因子,实验材料,胰蛋白酶,酶消化法,细胞形态学,生长曲线,生物学特性,转染,蛋白表达水平,细胞生长,生长状况,状况良好,细胞标记,标记基因,VIM,ACTA2,细胞存活率,RIG,MAVS,m6,YTHDF2
AB值：
0.271563
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