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典型文献
基于CFTR的H2受体调节剂高通量筛选细胞模型的构建
文献摘要:
目的 建立基于囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)高通量筛选组胺H2受体(histocompatibility-2)调节剂的模型.方法 应用RT-PCR、Western blot检测H2受体在Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞中表达情况.采用脂质体转染获取同时表达CFTR和黄色荧光蛋白双突变体YFP-H148Q/I152L的FRT细胞.荧光淬灭动力学实验检测细胞模型功能,判断该模型是否可以筛选H2受体的调节剂.结果 RT-PCR、Western blot结果显示,FRT内源性表达H2受体.采用倒置荧光显微镜观察,证实成功构建同时表达CFTR和YFP-H148Q/I152L的细胞模型.荧光淬灭动力学实验证明该模型具有cAMP激活氯离子通道的特性,可用于H2受体调节剂的筛选,且荧光斜率(slope)值与H2受体调节剂的浓度呈剂量依赖关系.结论 成功构建基于CFTR高通量筛选H2受体调节剂的细胞模型.
文献关键词:
囊性纤维化跨膜传导调节因子;H2受体;cAMP激活氯离子通道;大鼠甲状腺滤泡上皮细胞;高通量筛选细胞模型
作者姓名:
刘雪莹;吴明达;高雪伟;冯剑南;高俊涛;郝峰;庄文越
作者机构:
北华大学医学技术学院,吉林吉林132013;吉林医药学院,吉林吉林132013;延边大学医学院,吉林延吉133002
文献出处:
引用格式:
[1]刘雪莹;吴明达;高雪伟;冯剑南;高俊涛;郝峰;庄文越-.基于CFTR的H2受体调节剂高通量筛选细胞模型的构建)[J].中国药学杂志,2022(02):109-115
A类:
高通量筛选细胞模型,H148Q,I152L,大鼠甲状腺滤泡上皮细胞
B类:
CFTR,H2,调节剂,囊性纤维化跨膜传导调节因子,cystic,fibrosis,transmembrane,conductance,regulator,组胺,histocompatibility,blot,Fischer,FRT,脂质体转染,荧光蛋白,双突变,突变体,YFP,荧光淬灭,动力学实验,实验检测,模型功能,内源性,倒置,荧光显微镜观察,cAMP,氯离子通道,slope,剂量依赖,依赖关系
AB值:
0.239739
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