典型文献
重组双特异性抗体药物电荷异质性分析iCIEF方法新载体基质研究及验证
文献摘要：
目的:建立应用成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)法测定重组双特异性抗体(bsAb)电荷异质性的新载体基质的方法.方法:首先,对2种bsAbs在传统的载体基质甲基纤维素(MC)/羟丙甲基纤维素(HPMC)与新的甘油基质中的电荷异构体分离效果进行对比;然后,对甘油基质方法进行进一步优化,以研究甘油浓度、两性电解质种类及其终浓度、不同pH范围两性电解质的组合方式等对电荷异构体分离效果的影响,获得基于甘油基质最佳的分析条件;最后,应用甘油基质的最优分离条件进行了 iCIEF方法验证,包括精密度、准确度、线性范围及稳定性指示性验证等.结果:2种bsAbs在甘油基质中的电荷异构体的分离效果均优于HPMC载体基质,且方法的稳健性较好;方法验证结果显示:对于bsAb 1,酸区、主峰、碱区峰峰面积百分比的RSD均小于2.0％,精密度良好;在蛋白终浓度0.10～0.30 mg·mL-1范围内,主峰平均峰面积与蛋白浓度回归曲线r大于0.99,线性良好;每个浓度点的回收率均在95％～105％范围内,准确度良好.对于bsAb 2,酸区、主峰峰面积百分比RSD均小于2.0％,碱区峰面积百分比小于20.0％,精密度良好.该方法能够指示出产品电荷异构体的含量变化情况,可用于产品的质控.结论:使用甘油作为新的载体基质代替传统的HPMC载体基质进行iCIEF分析,具有分离度较好,稳定性强,准确性高,成本低等优势,解决了结构较复杂的重组双特异性抗体类药物在传统MC/HPMC载体基质中无法实现电荷异构体良好分离的难题,尤其适用于复杂的双特异抗体类药物的产品质量评估及质量控制.
文献关键词：
双特异性抗体;电荷异质性;甘油;载体基质;成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF);方法验证
中图分类号：
作者姓名：
卜令丽;张瑞宁;韩国华;刘振东;王庆民
作者机构：
齐鲁制药有限公司生物技术开发研究院,济南25100
文献出处：
引用格式：
[1]卜令丽;张瑞宁;韩国华;刘振东;王庆民-.重组双特异性抗体药物电荷异质性分析iCIEF方法新载体基质研究及验证)[J].药物分析杂志,2022(11):1927-1935
A类：
bsAb,bsAbs
B类：
双特异性抗体药物,电荷异质性,异质性分析,iCIEF,新载体,载体基质,毛细管,等电聚焦电泳,甲基纤维素,HPMC,异构体分离,分离效果,两性,电解质,组合方式,分析条件,分离条件,方法验证,精密度,线性范围,指示性,主峰,峰峰,峰面积,RSD,蛋白浓度,回归曲线,出产,含量变化,质控,分离度,体类,质量评估
AB值：
0.20241
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