典型文献
原代犬小肠上皮细胞的分离培养与鉴定
文献摘要：
旨在建立原代犬小肠上皮细胞分离培养及纯化的方法,为犬肠道病毒性、细菌性及寄生虫相关疾病研究提供细胞材料.采用组织块培养法分离培养原代犬小肠上皮细胞,胰酶差速消化法进行纯化,利用细胞形态学、间接免疫荧光法鉴定上皮细胞特性,脂多糖(LPS)刺激原代上皮细胞,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测炎性因子转录水平,鉴定原代犬小肠上皮细胞的功能.结果显示:组织块培养法获得的原代犬小肠上皮细胞可在24 h内贴壁,第3天细胞开始增殖,第4天时达到增殖顶峰,第5～7天细胞活性逐渐降低,在体外连续传代可培养至第10代.经胰蛋白酶差速消化纯化后,获得铺路石样原代犬小肠上皮细胞,生长曲线类似"S"形,上皮细胞特异性细胞角蛋白18(CK18)鉴定呈阳性,LPS可诱导犬小肠原代上皮细胞炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的转录水平在12h(P＜0.05)、24 h(P＜0.01)表达量呈显著和极显著差异.研究表明,利用组织块培养法可成功分离获得数量较多、纯度较高且具有典型上皮细胞形态和功能的犬小肠上皮细胞,获得的细胞为研究犬肠道疾病致病机理和相关研究提供了细胞模型.
文献关键词：
犬小肠上皮细胞;原代培养;纯化
中图分类号：
作者姓名：
赵艺越;马勋;郝科兴;王正荣;王静;薄新文
作者机构：
石河子大学动物科技学院,新疆石河子 832000;新疆农垦科学院畜牧兽医研究所/省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室,新疆石河子 832000
文献出处：
引用格式：
[1]赵艺越;马勋;郝科兴;王正荣;王静;薄新文-.原代犬小肠上皮细胞的分离培养与鉴定)[J].畜牧与兽医,2022(10):52-57
A类：
犬小肠上皮细胞
B类：
分离培养,细胞分离,肠道病毒,病毒性,细菌性,寄生虫,相关疾病,疾病研究,组织块培养法,胰酶,差速,消化法,细胞形态学,间接免疫荧光法,脂多糖,LPS,qPCR,炎性因子,转录水平,贴壁,天时达,顶峰,细胞活性,连续传代,可培,胰蛋白酶,铺路石,生长曲线,细胞特异性,细胞角蛋白,CK18,细胞炎症因子,12h,功分,得数,肠道疾病,致病机理,细胞模型,原代培养
AB值：
0.229481
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