典型文献
基于3种抗原的融合表达蛋白建立牛分枝杆菌抗体ELISA检测方法
文献摘要：
为建立一种诊断牛结核病的间接ELIISA方法,以牛分枝杆菌Rv3403c、CFP10和ESAT6蛋白为靶标抗原,通过酶切连接和重叠延伸PCR方法,将3个抗原基因串联在pET-28a载体上,基因之间用Linker序列连接,构建出pET-28a-Rv3403c-CFP10-ESAT6并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,纯化目的蛋白并分析其反应原性.以纯化后的融合蛋白作为包被抗原建立间接ELISA抗体检测方法.结果显示:通过SDS-PAGE和Western blot鉴定分析,成功表达并纯化出包涵体蛋白Rv3403c-CFP10-ESAT6,目的蛋白具有良好的反应原性;以融合蛋白为包被抗原建立的间接ELISA抗体检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,与其他牛病原体阳性血清不发生交叉反应.临床结果显示,本方法与商品化试剂盒阳性符合率为66.7％,阴性符合率99.3％,总符合率为99.3％.研究表明,成功串联表达了具有良好反应原性的融合蛋白Rv3403c-CFP10-ESAT6,并以此为包被抗原建立了一种牛分枝杆菌间接ELISA抗体检测方法,为检测和净化牛结核病提供了诊断工具.
文献关键词：
牛分枝杆菌;诊断抗原;Rv3403c;CFP10;ESAT6;融合表达;间接ELISA
中图分类号：
作者姓名：
潘家良;于有利;刘梦婷;单玉平;汤芳;任建鸾;薛青红;薛峰;戴建君
作者机构：
南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095;连云港市畜牧兽医站,江苏连云港 222000;中国兽医药品监察所,北京 100081
文献出处：
引用格式：
[1]潘家良;于有利;刘梦婷;单玉平;汤芳;任建鸾;薛青红;薛峰;戴建君-.基于3种抗原的融合表达蛋白建立牛分枝杆菌抗体ELISA检测方法)[J].畜牧与兽医,2022(05):121-127
A类：
ELIISA,Rv3403c
B类：
融合表达,牛分枝杆菌,牛结核病,CFP10,ESAT6,靶标,原基,联在,pET,28a,Linker,大肠杆菌,BL21,DE3,诱导表达,目的蛋白,反应原性,融合蛋白,包被抗原,抗体检测,SDS,PAGE,blot,鉴定分析,包涵体,灵敏性,牛病,病原体,体阳,阳性血清,交叉反应,临床结果,商品化,试剂盒,符合率,串联表达,种牛,诊断工具,诊断抗原
AB值：
0.304357
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