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1株抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定
文献摘要：
为鉴定猪流行性腹泻病毒(PEDV)核衣壳(N)蛋白的抗原表位,本研究通过原核表达N蛋白,纯化后免疫BALB/c小鼠,利用细胞融合和亚克隆技术,筛选出1株稳定分泌抗PEDVN蛋白抗体的杂交瘤细胞9B4.经鉴定单克隆抗体9B4的亚型为IgG1型,轻链为Kappa链.腹水抗体ELISA效价为106以上.ELISA、Western blot和免疫荧光鉴定结果显示该单克隆抗体反应原性和特异性良好.利用噬菌体展示技术对单克隆抗体9B4进行抗原表位鉴定,获得4个N蛋白的模拟抗原表位(C11、C12、C14和C26).随后分别以噬菌体阳性克隆为模拟抗原,对临床PEDV血清样品进行检测,发现其均能与猪PEDV阳性血清发生特异性结合,而与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)阳性血清、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)阳性血清不反应,说明本研究获得的N蛋白模拟表位可用于PEDV抗体的检测,有助于PED流行病学调查和PEDV疫苗免疫效果的评价.
文献关键词：
猪流行性腹泻病毒;N蛋白;单克隆抗体;抗原表位
中图分类号：
作者姓名：
殷一凡;季霖;马千惠;范红结;蔺辉星
作者机构：
南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095
文献出处：
引用格式：
[1]殷一凡;季霖;马千惠;范红结;蔺辉星-.1株抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定)[J].畜牧与兽医,2022(05):98-104
A类：
PEDVN,9B4
B类：
猪流行性腹泻病毒,单克隆抗体的制备,衣壳,原核表达,BALB,细胞融合,亚克,克隆技术,杂交瘤细胞,定单,IgG1,轻链,Kappa,腹水,效价,blot,免疫荧光,抗体反应,反应原性,噬菌体展示技术,抗原表位鉴定,C11,C12,C14,C26,体阳,清样,阳性血清,特异性结合,猪传染性胃肠炎病毒,TGEV,猪德尔塔冠状病毒,PDCoV,不反应,白模,流行病学调查,疫苗免疫,免疫效果
AB值：
0.260554
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