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非洲猪瘟病毒p30蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立与应用
文献摘要：
为建立非洲猪瘟病毒(ASFV)快速、高效和高通量的血清学诊断方法,本研究针对ASFVPig/HLJ/2018毒株序列CP204L(p30)基因,构建了重组质粒pET-28a-p30,并通过原核表达系统获得ASFV重组p30蛋白,试验发现重组蛋白主要在包涵体中表达.经Western blot鉴定重组p30蛋白的反应原性良好.通过带有His标签的镍柱进行亲和层析,将纯化后的目的蛋白作为包被抗原,建立了 ASFV抗体间接EL1SA检测方法.此方法引入S/P值进行阴阳性判定,其临界值为0.8.特异性试验表明本方法能够特异性地检测ASFV抗体.本方法批内变异系数在1.10％～6.70％之间,批间变异系数在1.08％～9.55％之间,均小于10％.灵敏性试验表明检测限可以达到1:1 024.将本研究建立的方法和商品化试剂盒进行了符合率的比较,结果显示,阳性符合率为98.91％(91/92),阴性符合率为98.75％(158/160),总体符合率为98.8％(249/252).研究表明,本方法具有良好的特异性、灵敏性、重复性和符合率,表明其性能良好,具有较强的临床应用价值.
文献关键词：
非洲猪瘟病毒;p30蛋白;间接ELISA;抗体检测
中图分类号：
作者姓名：
张锦;陈艳;邹剑文;周江飞;龙云凤;姜焱;周斌
作者机构：
南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095;南京海关动植物与食品检测中心,江苏南京 210019
文献出处：
引用格式：
[1]张锦;陈艳;邹剑文;周江飞;龙云凤;姜焱;周斌-.非洲猪瘟病毒p30蛋白的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立与应用)[J].畜牧与兽医,2022(03):83-90
A类：
ASFVPig,CP204L,EL1SA
B类：
非洲猪瘟病毒,p30,原核表达,抗体检测,建立与应用,血清学诊断,HLJ,毒株,重组质粒,pET,28a,表达系统,重组蛋白,包涵体,blot,反应原性,His,亲和层析,目的蛋白,包被抗原,阴阳,灵敏性,检测限,商品化,试剂盒,符合率,临床应用价值
AB值：
0.257349
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