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全局调控因子FNR对产肠毒素大肠杆菌生物学特性影响的研究
文献摘要：
为研究全局调控因子富马酸盐和硝酸盐减少调控蛋白(FNR)对产肠毒素大肠杆菌(ETEC)生物学特性的影响,本研究通过Red同源重组方法构建了ETEC MD724-020菌株fnr基因的缺失株Δfnr及回补株Δfnr(pfnr),分别将ETEC野生株(WT)、Δfnr以及Δfnr(pfnr)同时接种于TSB液体培养基培养,测定fnr基因缺失前后ETEC的生长曲线,结果显示,与野生株相比,缺失fnr基因后其生长速率无明显变化.将3株菌分别接种于TSB固体培养基,通过测定游走直径比较分析野生株、缺失株和回补株的运动性,结果显示,与野生株相比,缺失株Δfnr的运动能力显著降低(P<0.05).采用结晶紫法检测3株菌生物被膜(BF)形成能力,结果显示,相比WT和Δfnr(pfnr)株,缺失株Δfnr BF形成能力极显著下降(P<0.001).将3株菌分别于含10％绵羊血的TSA平板上划线培养,进行溶血性试验,结果显示,相比WT和Δfnr(pfnr)株,Δfnr株溶血圈较野生株显著缩小.将3株菌分别与猪小肠上皮细胞IPEC-J2互作2 h后,通过平板计数法分析各菌株对该细胞的黏附能力,结果显示,与野生株相比,缺失株Δfnr对IPEC-J2细胞的黏附能力显著减弱(P<0.05).提取上述互作后未黏附细菌的RNA,通过荧光定量PCR检测fnr基因缺失后对致病性ETEC相关毒力基因转录水平的影响,结果显示,与野生株相比,Δfnr株中eaeH、eltA和hlyA基因的转录水平均极显著下降(P<0.001).本研究首次对全局调控因子FNR影响ETEC的运动性、溶血性、BF形成能力等生物学特性进行了研究,为进一步开展ETEC致病机理的研究提供了参考依据.
文献关键词：
产肠毒素大肠杆菌;FNR;生物学特性
中图分类号：
作者姓名：
杨延;毛曌;江丰伟;李干武
作者机构：
中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江 哈尔滨 150069
文献出处：
引用格式：
[1]杨延;毛曌;江丰伟;李干武-.全局调控因子FNR对产肠毒素大肠杆菌生物学特性影响的研究)[J].中国预防兽医学报,2022(09):977-983
A类：
MD724,fnr,pfnr,eaeH,eltA
B类：
全局调控因子,FNR,产肠毒素大肠杆菌,生物学特性,富马酸,硝酸盐,少调,调控蛋白,ETEC,Red,同源重组,组方,缺失株,野生株,WT,同时接种,TSB,液体培养基,基因缺失,生长曲线,生长速率,固体培养基,游走,直径比,运动性,运动能力,结晶紫,生物被膜,BF,形成能,绵羊,羊血,TSA,上划,划线,溶血性,猪小肠上皮细胞,IPEC,J2,平板计数法,黏附能力,致病性,毒力基因,基因转录水平,hlyA,致病机理
AB值：
0.23665
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