为快速准确地监测1型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV-I)在我国的流行情况,本研究以分子筛纯化灭活的PRRSV-1(ZD-1株)为包被抗原,利用PRRSV-1的特异性单克隆抗体(MAbEU-1)为竞争抗体,经条件优化,建立了检测PRRSV-1的竞争ELISA(EU-C-ELISA)方法.反应条件优化结果显示,最佳抗原包被量为455 ng/孔,PRRSV-1 MAbEU-1的最佳稀释度为1∶8.EU-C-ELISA结果判定标准:血清样品抑制率PI≥45％时判定为阳性,PI＜45％判定为阴性.特异性试验结果显示,该方法仅能检测PRRSV-1阳性血清,与各谱系PRRSV-2及其他常见猪病毒和细菌阳性血清均无交叉反应;敏感性试验结果显示,该方法能检测出16倍稀释的阳性标准血清,并且最早可在PRRSV ZD-1株感染猪后第7 d检测到血清中PRRSV-1抗体阳转;批内和批间重复性试验的变异系数均小于5％,对比试验结果显示该方法特异性和敏感性均显著优于现有试剂盒对PRRSV-1抗体的检测.利用该方法对2020年采自黑龙江、辽宁、河北、山东省10个猪场的432份临床血清样品进行检测,2个猪场检出PRRSV-1抗体阳性,猪场阳性率达20％,样品总阳性率为15.0％,显示PRRSV-1抗体已存在于我国部分地区猪群中.本研究在我国首次建立了 PRRSV-1竞争ELISA抗体检测方法,为监测PRRS-1在我国的流行情况及科学防控该病提供了检测手段.

1型猪繁殖与呼吸综合征病毒;竞争ELISA;流行病学调查

许浒;相丽润;张文立;汤艳东;赵静;李超;龚邦俊;李宛生;付军;彭金美;王倩;周国辉;冷超粮;安同庆;蔡雪辉;张洪亮;田志军

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点猪病实验室,黑龙江 哈尔滨 150069;南阳师范学院,河南 南阳 473061

中国预防兽医学报

[1]许浒;相丽润;张文立;汤艳东;赵静;李超;龚邦俊;李宛生;付军;彭金美;王倩;周国辉;冷超粮;安同庆;蔡雪辉;张洪亮;田志军-.欧洲型PRRSV竞争ELISA抗体检测方法的建立及应用)[J].中国预防兽医学报,2022(06):617-623

MAbEU

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