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小鼠抗内质网相关的干扰素诱导病毒抑制蛋白(viperin)多克隆抗体的制备
文献摘要：
目的 以纯化的内质网相关的干扰素诱导病毒抑制蛋白(viperin)免疫小鼠制备其多克隆抗体并鉴定其特异性.方法 对BALB/c小鼠颅内注射鸭坦布苏病毒,刺激小鼠脑组织产生viperin,通过反转录PCR从小鼠大脑组织克隆viperin,并将其插入至pGEX-6P-1原核表达载体,转化至大肠杆菌Rosetta.用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)对重组蛋白诱导表达,对其进行可溶性分析,以氯化钾染色切胶法对大量表达蛋白进行纯化;将纯化的重组viperin蛋白经腹部皮下免疫小鼠制备多克隆抗体,利用间接ELISA测定多抗效价,Western blot法和间接免疫荧光法(IFA)检测BHK-21仓鼠肾成纤维细胞瞬时表达的viperin蛋白鉴定viperin抗体的特异性和敏感性.结果 成功克隆并表达小鼠viperin基因,制备的抗体效价可达1∶25 600,小鼠抗viperin多克隆抗体可特异性识别BHK-21细胞表达的viperin蛋白.结论 成功制备特异性较好的小鼠抗viperin多克隆抗体.
文献关键词：
内质网相关的干扰素诱导病毒抑制蛋白(viperin);原核表达;多克隆抗体
中图分类号：
作者姓名：
刘丹;于胜祖;方天;王蓓;张淼;吕炫;祝萌;王晴;王桂军
作者机构：
安徽农业大学动物科技学院预防兽医学科,安徽合肥230036;兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室,安徽合肥230036
文献出处：
引用格式：
[1]刘丹;于胜祖;方天;王蓓;张淼;吕炫;祝萌;王晴;王桂军-.小鼠抗内质网相关的干扰素诱导病毒抑制蛋白(viperin)多克隆抗体的制备)[J].细胞与分子免疫学杂志,2022(09):842-847
A类：
viperin
B类：
内质网,干扰素,病毒抑制,多克隆抗体,BALB,颅内,鸭坦布苏病毒,小鼠脑组织,pGEX,6P,原核表达载体,大肠杆菌,Rosetta,异丙基,半乳糖,糖苷,IPTG,重组蛋白,蛋白诱导表达,氯化钾,经腹部,多抗,blot,间接免疫荧光法,IFA,BHK,仓鼠,成纤维细胞,瞬时表达,蛋白鉴定,抗体效价,特异性识别
AB值：
0.240621
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