目的 白扁豆总皂苷是中药白扁豆经过提取分离纯化步骤制备得到,关于白扁豆的总皂苷成分如何影响前列腺癌细胞系PC-3细胞的生长情况缺少研究.因此,有必要探讨白扁豆总皂苷对前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的机制研究.方法 本研究采用CCK8方法检测不同浓度的白扁豆总皂苷对前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的影响.利用转录组学分析白扁豆总皂苷抑制前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的分子机制,并且进一步通过实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)实验对相关差异基因的表达进行验证.利用Western blot和CCK8检测白扁豆总皂苷处理过表达醛脱氢酶7家族成员Al(ALDH7A1)的PC-3细胞存活率.结果 随着白扁豆总皂苷浓度升高,前列腺癌细胞PC-3的存活率显著下降,白扁豆总皂苷的IC50值为1 086mg/L.转录组学测序结果显示,与对照组相比,白扁豆总皂苷处理的细胞中有2 360个差异表达基因,其中1 982个基因上调,378个基因下调.基因功能注释(GO)结果显示,差异表达基因显著富集到与有丝分裂纺锤体检查点(mitotic spindle checkpoint)、纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint)等一系列跟癌症的发生发展密切相关的生物学过程.此外,基因组京都百科全书(KEGG)分析结果也显示,差异表达基因富集在肿瘤代谢等信号通路.进一步对其中的差异基因进行验证,结果显示,与对照组相比,白扁豆总皂苷处理的前列腺癌细胞中ALDH7A1、甘氨酸C-乙酰转移酶(GCAT)和磷酸甘油酸变位酶家族成员4(PGAM4)的蛋白质表达水平明显降低(P＜0.05),而二甲基甘氨酸脱氢酶(DMGDH)和胱硫醚β合成酶样(CBSL)的蛋白质表达水平显著升高(P＜0.001).体外细胞实验结果表明,白扁豆总皂苷通过下调前列腺癌细胞中ALDH7Al的表达抑制PC-3细胞生长.结论 白扁豆总皂苷可能通过下调ALDH7Al表达从而在体外抑制前列腺癌细胞的生长.

前列腺癌;白扁豆总皂苷;转录组学测序

袁强华;韩君

成都中医药大学附属医院药剂科,成都610072;北京康仁堂药业有限公司中药配方颗粒关键技术国家地方联合工程研究中心,北京101301

生物化学与生物物理进展

[1]袁强华;韩君-.基于转录组学的白扁豆总皂苷抑制前列腺癌细胞系PC-3细胞生长的机制研究)[J].生物化学与生物物理进展,2022(08):1597-1606

白扁豆总皂苷,ALDH7A1,086mg,GCAT,PGAM4,DMGDH,CBSL,ALDH7Al

前列腺癌细胞,细胞系,细胞生长,提取分离,分离纯化,化步骤,生长情况,CCK8,转录组学分析,实时定量,qRT,蛋白质免疫印迹,blot,差异基因,过表达,醛脱氢酶,细胞存活率,IC50,转录组学测序,差异表达基因,基因功能注释,有丝分裂,检查点,mitotic,spindle,checkpoint,纺锤体组装,assembly,生物学过程,京都,百科全书,基因富集,肿瘤代谢,甘氨酸,转移酶,磷酸甘油,甘油酸,变位,蛋白质表达水平,二甲基,胱硫醚,合成酶,体外细胞实验,表达抑制,体外抑制

0.147024