典型文献
miR-150-5p在糖尿病肾病模型小鼠肾组织中的表达和对小鼠足细胞MPC5损伤的影响及其机制
文献摘要：
目的:探讨微小RNA-150-5p(miR-150-5p)在糖尿病肾病(DN)模型小鼠肾组织中的表达和对高糖诱导的小鼠足细胞MPC5损伤的作用,并阐明其作用机制.方法:20只昆明小鼠随机分为对照组(n=8,正常饲养)和DN组[n=12,高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)构建DN模型],采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组小鼠肾组织中miR-150-5p表达水平,采用免疫组织化学法和免疫荧光法观察2组小鼠肾组织中脑酸溶性蛋白1(BASP1)表达情况.采用不含干扰素-γ(IFN-γ)的培养基培养MPC5细胞2周,使其分化成熟,分为对照组和高糖处理(HG)组,HG组采用30 mmol·L-1 D-葡萄糖分别处理MPC5细胞12、24、48和72 h,采用RT-qPCR法和Western boltting法分别检测MPC5细胞中miR-150-5p和BASP1 mRNA及蛋白表达水平.采用生物信息学方法和双荧光素酶报告基因实验评估miR-150-5p与BASP1是否具有靶向关系.将miR-阴性对照(NC)、miR-150-5p模拟物(mimic)、miR-150-5p mimic+阴性对照质粒(pc-DNA3.1-SC)和miR-150-5p mimic+BASP1过表达质粒(pc-DNA3.1-BASP1)分别转入已分化成熟的MPC5细胞,分为正常条件+miR-NC(Con+NC)组、HG条件+miR-NC(HG+NC)组、HG条件+miR-150-5p mimic(HG+mimic)组、HG条件+miR-150-5p mimic+pc-DNA3.1-SC(HG+mimic+SC)组和HG条件+miR-150-5p mimic+pc-DNA3.1-BASP1(HG+mimic+BASP1)组;采用CCK-8法检测各组MPC5细胞活性,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组MPC5细胞中活性氧(ROS)水平和乳酸脱氢酶(LDH)活性,采用流式细胞术检测各组MPC5细胞凋亡率.结果:与对照组比较,DN组小鼠肾组织中miR-150-5p表达水平明显降低(P<0.01),BASP1蛋白表达量明显增加,且BASP1与足细胞存在共定位.与对照组比较,HG组MPC5细胞中BASP1蛋白表达水平明显升高(P<0.01),miR-150-5p表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01).BASP1是miR-150-5p的直接靶点.与Con+NC组比较,HG+NC组MPC5细胞活性明显降低(P<0.01),ROS水平、LDH活性和细胞凋亡率均明显升高(P<0.01);与HG+NC组比较,HG+mimic组和HG+mimic+SC组MPC5细胞活性明显升高(P<0.01),ROS水平、LDH活性和细胞凋亡率均明显降低(P<0.01);与HG+mimic+SC组比较,HG+mimic+BASP1组MPC5细胞活性明显降低(P<0.01),ROS水平、LDH活性和细胞凋亡率均明显升高(P<0.01).结论:miR-150-5p表达降低可能是DN模型中足细胞损伤的机制之一.过表达miR-150-5p可通过靶向BASP1抑制HG诱导的足细胞损伤.
文献关键词：
糖尿病肾病;足细胞损伤;miR-150-5p;脑酸溶性蛋白1;细胞凋亡
中图分类号：
作者姓名：
朱妤;王晶晶;吴芳
作者机构：
浙江大学医学院附属儿童医院 国家儿童健康与疾病临床医学研究中心中医科,浙江 杭州 310003;浙江大学医学院附属儿童医院国家儿童健康与疾病临床医学研究中心肾脏内科,浙江 杭州 310003
文献出处：
引用格式：
[1]朱妤;王晶晶;吴芳-.miR-150-5p在糖尿病肾病模型小鼠肾组织中的表达和对小鼠足细胞MPC5损伤的影响及其机制)[J].吉林大学学报（医学版）,2022(01):44-51
A类：
BASP1,mimic+BASP1,Con+NC,HG+mimic,HG+mimic+SC,HG+mimic+BASP1
B类：
5p,糖尿病肾病,肾病模型,模型小鼠,肾组织,MPC5,高糖诱导,昆明小鼠,饲养,高脂饮食,腹腔注射,链脲佐菌素,STZ,qPCR,免疫组织化学法,免疫荧光法,中脑,酸溶性,干扰素,IFN,分化成,糖分,别处,boltting,蛋白表达水平,生物信息学方法,双荧光素酶报告基因实验,实验评估,DNA3,过表达质粒,转入,+miR,HG+NC,mimic+pc,CCK,细胞活性,酶联免疫吸附测定,ROS,乳酸脱氢酶,LDH,流式细胞术,细胞凋亡率,共定位,足细胞损伤
AB值：
0.149721
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