典型文献
circRNA-NDUFA10抑制膀胱癌血管新生的机制研究
文献摘要：
目的 揭示circNDUFA10(has circ 0001118)在膀胱癌组织中的表达情况,并进一步探究其是否通过调控第10号染色体同源缺失性磷酸酶-张力蛋白基因(PTEN)/蛋白激酶B(Akt)/人血管内皮生长因子A(VEGF-A)信号通路抑制膀胱癌血管新生.方法 收集2016-08-02-2018-07-26于中山大学孙逸仙纪念医院行根治性膀胱切除术的膀胱癌患者癌组织和配对癌旁正常组织标本62例,qRT-PCR检测circNDUFA10在临床组织标本及人正常膀胱上皮永生化细胞(SV-HUC-1)和人膀胱癌细胞系(T24、UM-UC-3和5637)的表达.选取T24和UM-UC-3细胞进行siRNA转染以沉默circNDUFA10的表达,分别获得si-NC组、si-circNDUFA10#1组和si-circNDUFA10#2组.成管实验和Transwell实验分别检测各组细胞成管长度及细胞迁移情况.RNA pull-down实验检测miR-20b-5p与circNDUFA10的结合情况.选取T24和UM-UC-3细胞进行inhibitor和siRNA转染,分别获得NC inhibitor组、miR-20b-5p inhibitor组和miR-20b-5p inhibitor+si-circNDUFA10组.qRT-PCR检测miR-20b-5p对PTEN表达的影响.蛋白质印迹法检测circNDUFA10沉默后PTEN及其下游相关蛋白(Akt、p-Akt)的表达.qRT-PCR和ELISA实验检测circNDUFA10沉默后VEGF-A的表达.结果 circNDUFA10在膀胱癌组织中的相对表达量(-2.450±0.192)低于癌旁正常组织(0±0.212),差异具有统计学意义,t=8.576,P<0.001.circNDUFA10在膀胱癌细胞株T24(0.332±0.017)、UM-UC-3(0.359±0.021)和5637(0.422±0.024)中的相对表达量低于正常膀胱细胞SV-HUC-1(1.000±0.060),差异具有统计学意义,F=80.605,P<0.001.circNDUFA10沉默后,与T24 si-NC组(1.000±0.026)和UM-UC-3 si-NC组(1.000±0.023)相比,T24 si-circNDUFA10#1组(3.265±0.100),si-circNDUFA10#2组(3.227±0.068)及UM-UC-3 si-circNDUFA10#1组(2.812±0.089)和si-circNDUFA10#2组(2.760±0.056)膀胱癌细胞诱导HUVECs的相对成管长度均升高,差异具有统计学意义,F值分别为326.820和275.671,均P<0.001.与此一致,Transwell实验表明,circNDUFA10沉默后膀胱癌细胞诱导HUVECs的相对迁移细胞数目增多.Pull-down实验表明,与T24 oligo探针组(1.000±0.038)及UM-UC-3 oligo探针组(1.000±0.052)相比,T24 circNDUFA10探针组(2.836±0.093)与UM-UC-3 circNDUFA10探针组(3.354±0.136)miR-20b-5p的相对富集含量升高,差异均具有统计学意义,t值分别为18.31和16.20,均P<0.001.转染inhibitor和siRNA后进行回复实验表明,si-circNDUFA10可部分逆转miR-20b-5p inhibitor对PTEN表达调控的影响.circNDUFA10沉默后,PTEN蛋白的表达降低而p-Akt蛋白的表达升高.转染siRNA后,T24 si-circND-UFA10#1组(1.996±0.066)、T24 si-circNDUFA10#2组(1.949±0.082)和UM-UC-3 si-circNDUFA10#1组(1.886±0.057)、UM-UC-3 si-circNDUFA10#2组(2.074±0.058)的VEGF-A mRNA的相对表达量较T24 si-NC组(1.000±0.042)和UM-UC-3 si-NC组(1.000±0.037)升高,差异具有统计学意义,F值分别为73.784和124.741,均P<0.001.与此一致,ELISA实验表明circNDUFA10沉默后可以促进VEGF-A分泌.结论 circNDUFA10在膀胱癌组织和细胞中低表达,并通过miR-20b-5p/PTEN/VEGF-A轴抑制膀胱癌血管新生.
文献关键词：
膀胱肿瘤;环状RNA;血管新生;PTEN基因;血管内皮生长因子A
中图分类号：
作者姓名：
艾乐;冯梓贤;阴艺娜;苏民;李志花
作者机构：
中山大学孙逸仙纪念医院肿瘤科,广东 广州 510120;廉江市人民医院肿瘤血液科,广东 廉江 524400
文献出处：
引用格式：
[1]艾乐;冯梓贤;阴艺娜;苏民;李志花-.circRNA-NDUFA10抑制膀胱癌血管新生的机制研究)[J].中华肿瘤防治杂志,2022(23):1668-1675
A类：
NDUFA10,circNDUFA10,circNDUFA10#1,circNDUFA10#2,circND,UFA10#1
B类：
circRNA,血管新生,has,癌组织,张力蛋白,PTEN,蛋白激酶,Akt,人血,血管内皮生长因子,VEGF,中山大学,孙逸仙纪念医院,根治性膀胱切除术,膀胱癌患者,癌旁,正常组织,组织标本,qRT,永生化,SV,HUC,人膀胱癌细胞,细胞系,T24,UM,siRNA,转染,NC,成管实验,Transwell,细胞成管,管长,细胞迁移,移情,pull,down,实验检测,miR,20b,5p,inhibitor+si,蛋白质印迹法,相对表达量,细胞株,低于正常,细胞诱导,HUVECs,Pull,oligo,探针组,回复,表达调控,低表达,膀胱肿瘤
AB值：
0.163287
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