目的 探讨细胞粘附分子1(CADM1)修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)对口腔癌细胞生长与免疫相关指标的影响及机制.方法 分离培养5只BALB/c小鼠BMSC,分为腺病毒感染CADM1-BMSC组及阴性对照腺病毒感染NC-BMSC组;收集病毒感染BMSC的培养上清液,将人口腔癌细胞HSC3分为空白对照组、BMSC组、NC-BMSC组和CADM1-BMSC组,CCK-8法、EdU染色和细胞克隆形成实验检测细胞生长情况,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK-92 MI对细胞的杀伤作用,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞免疫因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达水平,蛋白质印迹检测细胞负性调节区域因子1(NCR1)与自然杀伤因子蛋白46(NKP46)的表达水平,流式细胞术检测细胞NKP46表达水平.结果 成功分离到小鼠源BMSC,经CADM1腺病毒感染的BMSC可见明显的绿色荧光蛋白表达.对照组、NC-BMSC组、CADM1-BMSC组的CADM1 mRNA相对表达量分别为1.00±0.05、1.01±0.06和3.65±0.32,CADM1-BMSC组上升,差异有统计学意义,F=32.145,P<0.001;各组CADM1蛋白相对表达量分别为0.42±0.04、0.40±0.03和1.28±0.09,CADM1-BMSC组上升,差异有统计学意义,F=25.674,P<0.001.空白对照组、BMSC组、NC-BMSC组和CADM1-BMSC组的细胞增殖活性、EdU标记的阳性细胞比例及细胞克隆形成数目之间差异均有统计学意义,均P<0.05;CADM1-BMSC组细胞增殖活性下降,且EdU标记的阳性细胞比例与细胞克隆形成数目均减少,F值分别为248.334和357.214,均P<0.001;各组细胞内TNF-α、IFN-γ及TGF-β1 mRNA相对表达量之间差异均有统计学意义,均P<0.05;CADM1-BMSC组的细胞内TNF-αmRNA相对表达量和IFN-γmRNA相对表达量均下调,TGF-β1 mRNA相对表达量上调,F值分别为32.019、40.127和76.454,均P<0.001.此外,NK-92MI细胞对肿瘤细胞的杀伤率升高,NCR1蛋白和NKP46相对表达量分别上调为1.22±0.09、2.21±0.19,差异均有统计学意义,F值分别为49.517、64.668,均P<0.001;NKP46表达也升高至(42.68±4.05)％,差异有统计学意义,F=124.632,P<0.001.结论 CADM1基因修饰的BMSC可抑制人口腔癌HSC3细胞生长,调节细胞释放细胞因子,增强NK-92MI细胞免疫杀伤性,其机制可能与调控NCR1/NKP46表达有关.

口腔癌;细胞粘附分子1;骨髓间充质干细胞;肿瘤细胞生长;免疫

王静;许小婷;王守儒

河南省中医院口腔科,河南 郑州 450002

中华肿瘤防治杂志

[1]王静;许小婷;王守儒-.CADM1基因修饰骨髓间充质干细胞对口腔癌细胞增殖和免疫因子的影响及机制)[J].中华肿瘤防治杂志,2022(20):1452-1459

人口腔癌细胞,NCR1,NKP46

CADM1,基因修饰,骨髓间充质干细胞,对口,细胞粘附分子,BMSC,免疫相关,分离培养,BALB,腺病毒感染,养上,上清液,HSC3,空白对照,CCK,EdU,细胞克隆形成,实验检测,生长情况,乳酸脱氢酶,LDH,杀伤作用,qRT,细胞免疫因子,干扰素,IFN,转化生长因子,TGF,蛋白质印迹,负性,流式细胞术,功分,绿色荧光蛋白,相对表达量,白相,细胞增殖活性,阳性细胞,92MI,调为,可抑制,细胞释放,杀伤性,肿瘤细胞生长

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