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巨自噬和分子伴侣介导自噬在内皮细胞氧化应激损伤中的特点
文献摘要：
目的 探究巨自噬和分子伴侣介导自噬(chaperone-mediated autophagy,CMA)这两种自噬途径在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化应激损伤中特点.方法 通过不同浓度(0、20、50、100、200 μg/mL)氧化低密度脂蛋白(oxidation low lipoprotein,OX-LDL)作用HUVECs后产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平筛选诱导HUVECs氧化应激的适宜浓度.设立空白对照组(不做任何处理)、单纯抑制巨自噬组(10 mmol/L 3-MA)、氧化应激组(50 μg/mL OX-LDL)和抑制巨自噬-氧化应激组(10 mmol/L 3-MA+50 μg/mL OX-LDL),检测各组细胞增殖标志蛋白PCNA、凋亡标志蛋白Caspase-3、巨自噬标志蛋白Beclin-1、分子伴侣介导自噬两种标志蛋白Hsc70和Lamp-2蛋白表达,评估不同处理下HUVECs增殖、凋亡及两种自噬的变化.其中氧化应激组和抑制巨自噬-氧化应激组处理不同时间(1、3、6、12、48 h)后,采用CCK-8检测细胞增殖抑制率,Annexin-V/PI双染检测凋亡,Western blot检测两种自噬途径蛋白Beclin-1、Hsc70、Lamp-2表达,评估巨自噬抑制前后氧化应激下HUVECs的增殖、凋亡及两种自噬的时间调控特点.结果 OX-LDL诱导氧化应激下ROS浓度呈递增关系,选择50 μg/mL为适宜浓度进行后续实验.与空白对照组比较,氧化应激组HUVECs Caspase-3、Beclin-1、Hsc70、Lamp-2上调,PCNA下调(P＜0.05),同时随处理时间延长,48 h内细胞增殖抑制率、全期凋亡率及Lamp-2递增,Hsc70在6 h后递增,12 h内Beclin-1水平递增(P＜0.05);与氧化应激组比较,抑制巨自噬-氧化应激组Caspase-3、Hsc70、Lamp-2上调,PCNA下调(P＜0.05),随处理时间延长,同时段Hsc70、Lamp-2上调,且Hsc70在3 h后递增(P＜0.05).结论 巨自噬和分子伴侣介导自噬在内皮细胞氧化应激过程中先后激活,巨自噬抑制后提高分子伴侣介导自噬水平,并提前激活时间,减轻氧化应激对内皮细胞的损伤.
文献关键词：
分子伴侣介导自噬;巨自噬;氧化应激;人脐静脉内皮细胞
中图分类号：
作者姓名：
王正力;訾亚飞;刘杨东;傅麒宁;王学虎
作者机构：
400016重庆,重庆医科大学附属第一医院血管外科;518111广东深圳,深圳大学附属华南医院血管外科
文献出处：
引用格式：
[1]王正力;訾亚飞;刘杨东;傅麒宁;王学虎-.巨自噬和分子伴侣介导自噬在内皮细胞氧化应激损伤中的特点)[J].陆军军医大学学报,2022(12):1221-1228
A类：
分子伴侣介导自噬,MA+50
B类：
巨自噬,氧化应激损伤,chaperone,mediated,autophagy,CMA,自噬途径,人脐静脉内皮细胞,human,umbilical,vein,endothelial,cells,HUVECs,氧化低密度脂蛋白,oxidation,low,lipoprotein,OX,LDL,reactive,oxygen,species,ROS,适宜浓度,空白对照,PCNA,Caspase,Beclin,Hsc70,Lamp,不同处理,CCK,增殖抑制,抑制率,Annexin,blot,呈递,随处,处理时间,凋亡率,高分子,激活时间
AB值：
0.187924
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