典型文献
茶树单宁酶的原核表达及酶学性质表征
文献摘要：
基于大肠杆菌的密码子偏好性,对茶树单宁酶基因CsTanA碱基进行优化,基因优化后GC含量为51.9％,密码子适应指数为0.8,优化前后基因序列的一致性为77.8％,以pET-30a为表达载体对优化基因进行重组表达及酶学性质分析.A600?nm约0.6的重组菌株以1?mmol/L的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷在30℃诱导12 h,破碎上清液重组单宁酶rCsTanA比活力为0.35?U/mg,镍柱纯化后的rCsTanA比活力为1.53?U/mg,纯化倍数约为4.4.纯化重组单宁酶rCsTanA分子质量为39?kDa,其最适温度和最适pH值分别为40℃和7.0.不同金属离子浓度对酶活力的影响存在差异,在低浓度(1?mmol/L)条件下,K+增强了rCsTanA 37.28％的酶活力,而Ag+、Cu2+和Fe3+使该酶活力均丧失80％以上;而在高浓度(5?mmol/L)条件下,Cu2+表现出完全抑制rCsTanA活性的特性.表面活性剂(十二烷基硫酸钠、吐温80和十六烷基三甲基溴化铵)和极性溶剂(甲醇、乙醇、丙三醇、异丙醇及丙酮)对rCsTanA活性具有较强抑制作用.本研究不仅实现了茶树单宁酶的表达和酶学性表征,同时也丰富了单宁酶资源,为植物单宁酶的进一步应用研究提供了必要的理论支撑.
文献关键词：
茶树;单宁酶;异源表达;密码子优化;酶学性质
中图分类号：
作者姓名：
陈伟;谷新晰;张莉娟;谈苏慧;田洪涛;卢海强
作者机构：
河北农业大学食品科技学院,河北 保定 071000
文献出处：
引用格式：
[1]陈伟;谷新晰;张莉娟;谈苏慧;田洪涛;卢海强-.茶树单宁酶的原核表达及酶学性质表征)[J].食品科学,2022(08):74-80
A类：
CsTanA,rCsTanA
B类：
茶树,单宁酶,原核表达,性质表征,大肠杆菌,密码子偏好性,酶基因,碱基,基因序列,pET,30a,表达载体,重组表达,酶学性质分析,A600,重组菌株,异丙基,半乳糖,糖苷,上清液,比活力,倍数,分子质量,kDa,金属离子浓度,酶活力,K+,Ag+,Cu2+,Fe3+,表面活性剂,十二烷基硫酸钠,吐温,十六烷基三甲基溴化铵,丙三醇,异丙醇,丙酮,强抑制,植物单宁,异源表达,密码子优化
AB值：
0.305381
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