典型文献
绵羊miR-127/FOXO4反馈环路及其对卵泡颗粒细胞凋亡相关基因表达的影响
文献摘要：
旨在研究oar-miR-127/FOXO4反馈环路及其对绵羊卵泡颗粒细胞的作用.本研究利用Promoter 2.0预测绵羊miR-127启动子,利用JASPAR数据库预测转录因子FOXO4与oar-miR-127启动子区的结合位点,构建包含预测结合位点的pGL3-basic-miR-127荧光素酶报告载体和pcDN A-FOXO4过表达载体;利用TargetScan软件在线预测oar-miR-127与FOXO4基因3'-UTR区结合位点,构建包含预测结合位点的pmir-GLO-FOXO4野生型、突变型和缺失型荧光素酶报告基因重组质粒;将pGL3-basic-miR-127荧光素酶报告载体和pcDNA-FOXO4过表达载体共(或单独)转染体外培养的绵羊卵泡颗粒细胞,FOXO4突变型、野生型和缺失型重组质粒与miR-127 mimic/mimic NC共转染体外培养的293T细胞,48 h后检测荧光素酶活性;pcDNA-FOXO4过表达载体(miR-127 mimic/mimic NC)转染绵羊卵泡颗粒细胞48 h,利用qRT-PCR检测miR-127(FOXO4)及凋亡基因(Casp3、Bax及BCL2)的表达水平.过表达转录因子FOX O4显著降低了oar-miR-127启动子相对荧光素酶活性(P＜＜0.05)和oar-miR-127表达水平(P＜0.05);miR-127 mimic和FOXO4野生型重组质粒共转染的颗粒细胞荧光素酶活性显著低于共转染miR-127 mimic和FOX O4缺失/突变型重组质粒的细胞(P＜0.05).转染miR-127 mimic的颗粒细胞中FOXO4表达量显著降低(P＜0.05),Casp3和Bax基因表达水平极显著升高(P＜0.001);过表达转录因子FOXO4的颗粒细胞中Casp3和Bax的表达水平无显著变化(P＞0.05),但BCL2相对表达量显著降低(P＜0.05).本研究证实了oar-miR-127与靶基因FOX O4间存在反馈环路,并促进绵羊卵泡颗粒细胞的凋亡,为研究其在绵羊卵泡发育中的作用机制奠定了基础.
文献关键词：
miR-127;FOXO4;绵羊颗粒细胞;细胞凋亡
中图分类号：
作者姓名：
付强;岳巧娴;锡建中;宋鹏琰;陈晓勇;周荣艳
作者机构：
河北农业大学动物科技学院,保定071001
文献出处：
引用格式：
[1]付强;岳巧娴;锡建中;宋鹏琰;陈晓勇;周荣艳-.绵羊miR-127/FOXO4反馈环路及其对卵泡颗粒细胞凋亡相关基因表达的影响)[J].畜牧兽医学报,2022(01):66-75
A类：
oar,pcDN,绵羊颗粒细胞
B类：
miR,FOXO4,反馈环,环路,卵泡颗粒细胞,颗粒细胞凋亡,凋亡相关基因,相关基因表达,研究利用,Promoter,JASPAR,启动子区,结合位点,pGL3,basic,过表达载体,TargetScan,在线预测,UTR,pmir,GLO,野生型,突变型,荧光素酶报告基因,基因重组,重组质粒,pcDNA,体外培养,mimic,NC,共转染,293T,荧光素酶活性,qRT,凋亡基因,Casp3,Bax,BCL2,基因表达水平,相对表达量,靶基因,卵泡发育
AB值：
0.189926
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